绍兴动物模型实验自噬凋亡检测「英瀚斯」

动物模型的设计原则

可靠性

的动物模型来应该力求可靠地反映人类***，即可特异地、可靠地反映某种***或某种机能、代谢、结构变化，应具备该种***的主要症状和体征，经化验或 X 照片、心电图、病理切片等证实。若易自发地出现某些相应病变的动物，就不应加以选用，易产生与***相混淆的***者也不宜选用。狗等大动物常用的穿刺点：胸骨：穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。例如铅可用大白鼠做模型，但有缺点，因为它本身容易患动物地方性及进行性，后者容易铅所致的相混淆，不易确定该是铅所致还是它本身的***所致。用蒙古沙土鼠就比较容易确定，因为一般只有铅才会使它出现相应的变。

实验动物的选择

大鼠

大鼠的门齿很长，在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤,所以,不要突然式地去抓它，取用时应轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，这样即可进行尾静脉取血或***。(一)剪毛法：剪毛法是将动物固定后，先用蘸有水的纱布把被毛浸湿，再用剪毛剪刀紧贴皮肤剪去被毛。如要作腹腔***或灌胃等操作时，实验者应戴上棉纱手套(有经验者也可不戴)，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其，以防尾巴皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。

前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响

　　方法：分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组，选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组，采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平；收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs，运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法，观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。(六)打孔或剪缺口法：可用打孔机在兔耳一***置打一小孔来表示一定的号码。

　　结果：随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao，其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）；结果jia亢方能降低jia亢大鼠xie清T3、T4、FT3、FT4含量,提高xue清TSH,以高剂量效果显著。0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积，形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加（P<0.05）；HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强，HUVECs趋化的数量显著升高（P<0.05）；研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848，可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应（P<0.05）。

Y迷宫主要应用于动物的辨别性学习，工作记忆及参考记忆的测试。Y迷宫由三个完全相同的臂组成。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记，只记录它们的外表特征和毛色即可。每个臂尽头有食物提供装置，根据分析动物取食的策略即进入各臂的次数、时间、正确次数、错误次数、路线等参数可以反映出实验动物的空间记忆能力。相对而言，Y迷宫简便、可行，相对八臂迷宫来说更加简单，有一定的实用性，现常用于学习记忆功能评价。

Y迷宫、八臂迷宫这类食物奖赏型迷宫任务能够检测啮齿类动物与海马和前额叶脑区相关的空间参考记忆和空间工作记忆。当动物在迷宫中寻找食物时，动物需要根据迷宫周围的视觉标示，记住它已搜寻过的迷宫臂，以避免重复进入同一个臂，从而有效地获得食物。对于PAN导致shen脏损害的机制目前尚不十分清楚,然而,人们通过细胞培养和动物实验对其发生h发展机制进行不断的深人研究，也取得了可喜的成果。这种类型的记忆能指导进行中的行为，被称为工作记忆。

  Y迷宫实验模型用来研究啮齿类动物的空间识别记忆能力，这相对于被动回避等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。