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发布时间:2021-11-16 00:59:37
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平;直接收集胃液法急性实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);因此要求研究者懂得,各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响,以及动物***在***学、生化学、病理学等方面与人类***之间的差异。研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。
大鼠烫l伤动物模型
方法 按30mg/kg体重的剂量经腹腔***3%戊巴l比妥钠麻l醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热自来水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,以纱布接触大鼠皮肤后计时。
(2)模型特点 大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐***素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑。致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。光镜观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清。表皮内有水疱形成,***水肿、间质疏松,胶原纤维断裂,嗜酸性染色性能减退,呈嗜双色性。血管扩张、充血,皮脂腺、汗腺腺上皮细胞及毛囊上皮细胞尚清楚,部分肿胀、溶解。皮下***中血管扩张、充血。致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解。表皮内有水疱形成,***层间质疏松、充血,胶原纤维融合成片,嗜酸性染色性能减退,呈嗜双色性,大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被***,结构不清,***深部可见残余毛囊。皮下***血管扩张、充血l、水肿明显,结构未***。NT9组和NT18组大鼠美加明激发后出现更多的戒断症状(P<。上述结果表明,致伤3s大鼠为浅Ⅱ度烫l伤,致伤10s大鼠为深Ⅱ度烫l伤.
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