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发布时间:2021-11-21 01:29:34
实验动物的采集方法
1. 大鼠、小鼠的采集:用***脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用吸取少量的Hank平衡盐溶液,冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查,可将胸骨或股骨剪断,将其断面的挤在有稀释液的玻片上,混匀后涂片凉干即可染色检查。
2. 大动物的采集:狗等大动物的采集可采取穿刺方法。膀胱原位***模型方法分组及处理雌性C57BL/6小鼠150只,随机。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到的距离,把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,穿入固定后,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集,一般采用髂骨穿刺。
狗等大动物常用的穿刺点:胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各点的中点。胫骨:穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔,防止发生。
1 被动吸烟模型
(1)方法 实验豚鼠(雌雄不限),将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中,每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次,1次/d,5d/周,连续1, 3, 6, 12个月作肺***病理学及肺功能检查),即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。
(2)模型特点 本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退,造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境,模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展,不能***正常。(三)法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关;因模型时间较长,实验过程中影响因素较多,模型的稳定性相对较差。
2 蛋白酶模型
(1)方法 成年大鼠(雌雄不限),经yi醚后仰卧固定头部及四肢,轻拉鼠舌,压迫舌腹,在额镜直视下,趁大鼠呼吸瞬间,迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处,随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液,注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。病理表现为纤维***和平滑肌为主,可有大量泡沫样细胞形成斑块,这与人类的情况差距较大。滴完溶液后,可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作,以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布,然后大鼠自由饮水进食。
(2)模型特点 大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。这类模型在遗传病、代谢病、缺陷病、***和等方面的应用正日益增多。病理***学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了***,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。但本模型(犬)在测定肺功能时表明,动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例,同时病理***学也证实动物气道萎缩,气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。
心率shi常模型
房室传导阻滞和房室交接区传导常性心律shi常多选用狗、猫,在ma醉开胸暴露心脏的情况下,于距犬心尖部1.5~ 2cm处的左室心肌内注入热生理盐水(80~90C)或95%酒精、25%***10~ 15ml (猫和兔注入4~ 7ml),引起心肌大片的局部坏死性。洛桑瑞士联邦技术学院的GregoireCoultine是这项研究的主要研究者。也可在狗的房室交接部( 即在左心房下部、心房、下腔静脉和前房室沟三者交汇点的前上方约0. 5cm处),用***针头垂直刺入房间隔下部房室结区,缓缓注入95%或无水酒精2~ 5ml,造成核处***坏死。还可采用豚鼠,自左心耳向左房内***腺苷5 Hg, ,注后1秒钟左右,即出现典型的II度或II度以上的传导阻滞,较严重时,房室完全停搏,停搏时间与剂里呈平行关系,心率和心律仅在数秒或十几秒即可***。此模型重复性好,但传导阻滞持续时间短,不易用其进行观察,如果***腺苷剂里大,则传导阻滞不易复原。除豚鼠外,腺苷对其他动物一般不引起传导阻滞。
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