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泸州临床前动物实验咨询***「在线咨询」

发布时间:2021-12-06 04:17:33        







在各种致病因素作用下,大脑实质受到损伤后可出现***功能改变,如偏瘫、平衡失调等。

对于***系统***动物模型而言,造模结束只是步,验证个体模型是否成功是第二步,而控制组内个体特征一致性是第三步。

采用***功能评分是重要的观察指标,可以用来在体评价模型是否成功或者病变严重程度。尽量控制动物模型的评分一致性是很困难但不得不做的一件事。

这里介绍三种常见的啮齿类***功能评分方法。


一、【Longa评分法】

① 无***功能缺陷:0分;

②瘫痪侧前爪不能完全伸展:1分;

③行走时向瘫痪侧转圈:2分;

④行走时向瘫痪侧倾倒:3分;

⑤不能自动行走,存在意识丧失现象:4分。

二、【Bederson评分法】

抓起动物的尾巴,使动物离台面10cm高。此时,正常大鼠的前爪处于伸直状态,而存在***功能病变的动物则可出现如下表现:

②动物尾巴提起后,瘫痪侧前肢回收并屈于腹下,而正常侧肢体伸向台面:1分;

③除第二条表现以外,俯卧于台面时向瘫痪侧侧推动物的阻力较正常侧明显降低:2分;

④除条和第二条以外,动物行走时向瘫痪侧旋转:3分。

三、【平衡木评分法】

一根长为80cm、宽为2.5cm的木条,水平固定在离台面10cm高度的地方,然后让动物在木条上行走。

①能跳上平衡木条,可以自由行走但不跌倒:0分;

②能跳上平衡木条,动物在上面行走会跌下,但跌下的机会小于50%:1分;

③能跳上平衡木条,动物在上面行走会跌下,但跌下的机会大于50%:2分;

④动物在正常侧身体的帮助下可以跳上平衡木条;但是瘫痪侧的后肢不能够帮助身体向前移动:3分;

⑤动物无法在平衡木条上行走,但是可以坐在木条上:4分;

⑥将动物放在木条上,动物很快会掉落下来:5分。









五、注意事项

1.  小宫设备和实验程序与大鼠类似,但迷宫规格应比大宫小,以免增加小鼠行为操作难度。

2.  本实验也可只用来测定工作记忆。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只选4个臂放置食粒。

3.  慢性应激对动物的迷宫操作可产生影响,且存在性别差异。经过慢性应激以后,雄性大鼠***减弱,表现为记忆错误频率增加;雄性大鼠的空间记忆反而增强,表现为错误频率减少。

4.  即使在限制进食条件下,也应让大鼠体重每周增加5g,以免动物因营养不良而患病。剔除身体状态不良的动物。

5.  迷宫周围的任何一件物品均可被动物用来作为空间定为的标志。去除或移动这些标志可能使动物操作困难并降低迷宫臂选择的准确性。






灌注固定主要用于***系统,其他***意义不是很大,而且耗时耗力。对***系统防止变性效果较好!

小鼠灌注

灌流固定小鼠时一般采用输液器的针头 (4 号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升多聚甲醛,整个灌流固定的过程就完成了。








2.2旋转圆筒睡眠剥夺法

此方法于 1979 年先应用于睡眠剥夺实验中,设备主要由一柱形圆筒及一小型慢速马达构成。圆筒直径 30 cm,高 30 cm 。圆筒底由 PVC (聚)构成,侧壁由直径为 10.4 m m 的 PVC 杆围成。杆长度 30 cm,杆之间间隔 15.5 m m,圆筒与小型马达相连。马达转速为每 45 s转 1 圈(也有学者应用每 m in 转 1 圈)。至少在实验前 2 d每天将大鼠放入圆筒中适应环境 1 次,适应时间不少于 3 h。实验时将马达按 45 s每1 圈进行匀速转动,通过圆筒的转动带动大鼠不停运动而达到睡眠剥夺的目的。此类方法简单易行,睡眠剥夺效果明显。缺点是长时间不停运动可引起机体的运动后应激反应及身体疲劳,可能干扰睡眠剥夺实验结果! 此类方法发展出多种变化,有实验者在进行新生大鼠睡眠剥夺时将筒旋转速调节至 2~3 r/m in后期逐渐增加至 6~7 r/m in。






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