实验动物高通量测序检测「英瀚斯」

1 被动吸烟模型

(1)方法  实验豚鼠(雌雄不限)，将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中，每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次，1次/d，5d/周，连续1, 3, 6, 12个月作肺***病理学及肺功能检查)，即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。

(2)模型特点  本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退，造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境，模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展，不能***正常。这类模型在遗传病、代谢病、缺陷病、***和等方面的应用正日益增多。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关；因模型时间较长，实验过程中影响因素较多，模型的稳定性相对较差。

2 蛋白酶模型

(1)方法  成年大鼠(雌雄不限)，经yi醚后仰卧固定头部及四肢，轻拉鼠舌，压迫舌腹，在额镜直视下，趁大鼠呼吸瞬间，迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处，随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液，注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约5mm，从尾根部向尾端部，血即从断端流出。滴完溶液后，可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作，以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布，然后大鼠自由饮水进食。

(2)模型特点  大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化，肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65％，而到第8日就不再变化，而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。如果是取少量的作检查，可将胸骨或股骨剪断，将其断面的挤在有稀释液的玻片上，混匀后涂片凉干即可染色检查。病理***学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了***，而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多，以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。但本模型(犬)在测定肺功能时表明，动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例，同时病理***学也证实动物气道萎缩，气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。

睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm， 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上，对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上，周围是水环境,水深3 cm，平台在水面以上1 cm，于平台以上14 cm 处放笼罩，上面放水和食物。造模过程中，每日观察动物的一般活动状况，每周称量动物体重，造模结束后抽取全血制备xue清、称取部分肝***制备匀浆作生化检测，摘取一些qi官称重，换算成脏器系数，并对肝***进行***形态学检查。水温和室温保持在25 C，每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立，在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 时，由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头，大鼠落入水中而惊醒，再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。

 旷场实验( open field test， OFT )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱，底面平均分为25个小方格，正上方2 m处架一摄像机，镜头对准箱底，实验在安静环境下进行，大鼠置于方箱底面中心，同时进行摄像和计时，3 min 后停止摄像,更换动物后，继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常消化，从小胃可收集到纯净的胃液。计分方法:通过放像设备，观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分，后肢站立次数为垂直得分，两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。

记忆再现缺失动物模型怎么制备/

　　1.建模材料动物：老鼠1，药1物：酒精，设备：DS-2老鼠声光单向穿梭箱。

　　2.建立模型的方法是训练以避开黑暗。训练后，在重新测试前30分钟给予小鼠40％酒精0.1 ml/10 g，然后重新测试并在30分钟后测试***。也可以使用皮下1***，并且在训练前5分钟和训练后24小时向小鼠***10 ml/kg的40％酒精。

　　避免使用深色方法：在实验过程中，将鼠标脸放回明亮房间的孔中，然后同时启动计时器。动物离开洞穴，进入黑暗的房间，受到电1击，计时自动停止。多样硬化模型（EAE）EAE模型可由来自髓鞘的蛋白如髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐剂(CFA)免yi诱导，mian疫当天及两天后腹腔***百ri咳毒su(PTX)而构建。弹出鼠标，记录下进入暗室所需的时间，然后将其置于暗室中，然后经历电1击。这是潜伏期。 24小时后重复测试，并记录进入暗室的动物数量，潜伏期和5分钟内的电1击次数（错误的次数）。如果您没有在5分钟内进入暗室，则潜伏期为300秒。

　　3.建模原理酒精具有***情绪的作用，这可能会影响***。

　　4.建模后的更改。激动时，我在服药后20分钟内出现，此后变得安静，但步态却摇摆不定。暗保护方法表明正常对照组的测试错误数为（0.96±0.58）s，测试错误的潜伏期为（221.2±29.8）s。模型组中的测试错误数为（3.74±0.69），测试错误的潜伏期为（48.7±19.3）s。平台跳跃和水迷宫实验均显示出明显的记忆障碍。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，可分别收集到胰液和胆汁。

1.2 实验方法优势

这种实验方法相对于被动回避（穿梭实验、避暗实验）等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。

2、电刺激Y迷宫测试原理

 该测试方法更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。

2.1 电刺激Y迷宫使用方法

Y 迷宫由3 个相同的臂组成,分别称为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。通常把下臂( Ⅰ臂)定为起步区,左侧( Ⅱ臂) 为安全区,右侧( Ⅲ臂) 为区,三臂相交处为隔离区(0 区) 。迷宫底铺以铜棒,可以通电刺激。三臂顶端各装有15W 的信号灯。实验前先将大鼠放入迷宫,让其适应5 min ,训练组大鼠在起步区予以致其逃至安全区,灯光持续15 s ,然后熄灯休息45 s ,开始下一次操作。每次实验在每只大鼠上重复20 次为一轮。实验在黑暗、安静的环境中进行。凡大鼠受后10 s 内一次性从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续10 次中正确反应达9 次或以上定为学会标准。达到学会标准所需的次数表示学习记忆成绩,次数少说明学习能力强。病理***学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了***，而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多，以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。