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灌注固定主要用于***系统，其他***意义不是很大，而且耗时耗力。对***系统防止变性效果较好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠时一般采用输液器的针头 (4 号半，这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白，针头要从心轴方向进针，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，开始灌流后剪破右心耳，约 40 毫升生理盐水，后再灌流约 20 毫升多聚甲醛，整个灌流固定的过程就完成了。

1.3改良多平台睡眠剥夺法

在MMPM 中将 10 只大鼠(具体数目可根据实际需要确定)同时放在装有 14 或 15 个台的水槽中(长 127 cm ，宽 44 cm ，高 45 cm )进行实验，这样既避免了 SP及M P中单只大鼠与群体隔离的缺点，又保留了 M P 中活动范围增大的特点，因在实验时大鼠多是 3 只或 4 只一笼进行饲养，如 1 组实验需 10 只大鼠，则需要3笼或 4笼大鼠，考虑到来自不同笼的大鼠放在一起实验也可能造成群体的不稳定，有学者将实验方法进一步改良，将实验所需的 10 只大鼠放在同一只笼中饲养 2 周，实验时再将这些大鼠放在一起同时进行睡眠剥夺实验，这样以克服实验时大鼠群体不稳定的缺点，从而将实验时的不确定因素减至低! 实验研究发现在MMPM中'经采取措施保持大鼠群体稳定性及避免大鼠与群体分离后' 大鼠上腺重量%体重减轻量%中促上腺皮质(A CTH )和上腺皮质酮 (CO RT) 的含量均较M P中为低，提示M M PM 较 M P 具有更低的应激性，是较为理想的REM 剥夺方法。

3轻柔刺激法

此方法在短期的睡眠剥夺实验中应用较多，当实验人员通过观察大鼠行为或通过脑电波监护观察到大鼠进入睡眠时，通过轻轻拍打大鼠笼子或应用声音、光线的刺激促使大鼠保持清醒，必要时还可用纸卷、铅笔或用手直接触摸大鼠使大鼠无法进入睡眠。注意不能将大鼠移出笼外!此方法简单易行，在脑电监护情况下可进行 TSD 或 SSD 实验，在无脑电监护时需要实验人员在旁不间断观察大鼠行为，故较适合行短时间的睡眠剥夺实验。

4睡眠剥夺法

定时给大鼠***， 此类方法简单易行，操作方便，不需要特殊仪器。缺点是大鼠存在个体差异， 睡眠剥夺的效果及程度及不易掌握。多用在研究某些特殊药理作用的实验中。