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tang尿病模型

tang尿病构建

一般tang尿病模型构建的方法有：自发突变，饮食诱导，化学诱导，***诱导，/***敲除等。此方法为饮食诱导＋化学***诱导，一般是用STZ加高脂高糖的膳食诱导来构建tang尿病模型模型。STZ即链脲佐菌素streptozocin简称，是一种小片状或者棱柱状结晶体，能溶于水。造模过程中，每日观察动物的一般活动状况，每周称量动物体重，造模结束后抽取全血制备xue清、称取部分肝***制备匀浆作生化检测，摘取一些qi官称重，换算成脏器系数，并对肝***进行***形态学检查。因其对一定种类的动物的胰岛β细胞有选择性***作用，能诱发许多动物的tang尿病，所以一般用它来构建糖tang尿病模型。

实验方法

Step1：用高脂肪高糖的膳食饲喂小鼠，诱导出胰岛素，持续约4-6周；

Step2：***STZ溶液：术前禁食12小时，之后进行给药处理；

Step3：一段时间以后取血，用血糖yi检测小鼠的禁食12h的血糖浓度；

Step4：血糖浓度≥16.7mmol/L时判断建模成功，称量体重。

前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响

　　方法：分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组，选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组，采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平；收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs，运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法，观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。为了增加所动物***模型与人类***的相似性，应尽量选用各种敏感动物与人类***相应的动物模型，可参考相关文章《各种敏感动物与人类相似的***模型》。

　　结果：随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao，其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）；如运动能力及社会交往能力下降、探索行为能力下降、qin犯攻击能力缺陷、xing行为能力下降等。0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积，形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加（P<0.05）；HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强，HUVECs趋化的数量显著升高（P<0.05）；研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848，可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应（P<0.05）。

HBV模型的建立方法

（1）方法:主要使用各种技术来创建HBV病毒小鼠模型。小鼠模型可分为HBV部分片段和HBV全长或超长序列模型。

（2）模型特征HBV小鼠不受HBV的影响，不会引起免yi清除。该模型可用于观察HBV对肝细胞的直接***作用。含有外源启动子的HBsAg小鼠（50-4）产生大量HBsAg大包膜蛋白。大鼠癫xian模型利用yao物制备癫xian模型(yao物建模)***yao物，通过***脑部***递质释放的平衡，阻断兴奋性氨基酸的循环通路，诱发dian痫发生。这会导致很长的，有时是分支的杆状HBsAg积聚在肝细胞的内质网中，并且无法有效分泌。肝细胞显示出毛玻璃变色并损害肝细胞。小鼠中的HBV标记主要在gan脏中表达，也可以在shen脏，yi腺和外周血等qi官中表达，尤其是在1,096 bp 1.3拷贝的HBV小鼠中。xue清HBV DNA的水平相当于3x10000000至9x10000000***组当量/毫升，相当于慢性HBVgan染者的水平。它可以检测血液中的HBsAg，S1前和HBeAg，是用于yao物筛选的you秀模型。

（3）建立比较yao物HBV小鼠模型在HBV分子生物学和免yi学研究中，特别是在加强肝细胞HBV感ran的分子机制方面，具有重要意义。

1.2 实验方法优势

这种实验方法相对于被动回避（穿梭实验、避暗实验）等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。

2、电刺激Y迷宫测试原理

 该测试方法更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。

2.1 电刺激Y迷宫使用方法

Y 迷宫由3 个相同的臂组成,分别称为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。通常把下臂( Ⅰ臂)定为起步区,左侧( Ⅱ臂) 为安全区,右侧( Ⅲ臂) 为区,三臂相交处为隔离区(0 区) 。迷宫底铺以铜棒,可以通电刺激。B组在灌注后第7天始每隔3d处死3只解剖观察膀胱肿liu生长情况及有无转移,并取qi官***(膀胱、shen、输尿管。三臂顶端各装有15W 的信号灯。实验前先将大鼠放入迷宫,让其适应5 min ,训练组大鼠在起步区予以致其逃至安全区,灯光持续15 s ,然后熄灯休息45 s ,开始下一次操作。每次实验在每只大鼠上重复20 次为一轮。实验在黑暗、安静的环境中进行。凡大鼠受后10 s 内一次性从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续10 次中正确反应达9 次或以上定为学会标准。达到学会标准所需的次数表示学习记忆成绩,次数少说明学习能力强。