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高架十字迷宫行为学检测：

实验原理

高架十字迷宫（the elevated plus maze,EPM）是评价啮齿类动物焦躁反应的实验方法 , 相较伤害性刺激所致小鼠焦躁行为检测（如电刺激 、 噪声刺激 、 饮食剥夺和暴露在捕食者气味等）, 该实验具有操作简单的优点 , 能直观反映小鼠的条件应答 。 EPM实验是在高架Y型迷宫的基础上发展而来的 。 EPM由开臂（open arms和闭臂（closed arms）各两条组成 , 呈十字形交叉 , 交义部分为***区 , 距地面有一定高度 。其原理是由于面对新事物开臂 小鼠会产生好奇心去探究 , 而它们有嗜暗的天性（闭臂）, 两者之间发生探究与回避的冲突行为，产生焦躁心理。整个迷宫距离地面的高度相当于人类站在悬崖边，易导致动物产生恐惧不安的心理。可以通过对比小鼠在开臂和闭臂内的滞留时间和路程来评价小鼠的焦躁行为。

EPM实验在***开发和研究中得到广泛的应用：主要用于苯二氮卓类***的抗焦躁作用研究 及筛选具有抗焦l虑作用的新药,也被用于研究精神性***滥用的影响及激s素的功能,应激对生殖、***、妊s娠的影响等。抗焦l虑药主要选择性地***边缘系统 的海马、杏仁核 ,产生抗焦躁作用。

高架十字迷宫试验 ：

EPM ) 既可以建立焦躁应激的模型也是国际上公认的经典测量焦躁反应的方法。其原理是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐 惧心理, 形成动物的矛盾冲突来考察大鼠的焦躁状态。 EPM 测试的项目中, 焦躁动物的 OE% 和 OT% 会明显降低, 经典抗焦躁药则使两者升高, OE + CE 反映了动物的运动活性。本研究发现模型组大鼠的 OE% 和 OT% 显著下降, 运动活性也降低。HD反映了动物在非保护区内的探索行为, 代表动物对陌生环境的好奇探究或因恐惧而寻求逃避, 与焦躁程度有一定相关性, 本研究中空瓶应激后的大鼠 HD行为减少; RR可用来观察药有无***作用及***强度。上述结果证实, 慢性应激后的大鼠明显处于焦躁状态, 说明慢性焦躁应激大鼠模型的制备成功, 且通过量化的标准客观反映出大鼠的焦l虑程度。

2强迫运动睡眠剥夺法

此类睡眠剥夺方法形式多样，在脑电监护情况下可行全部的睡眠剥夺和选择性的睡眠剥夺。其共同特点是通过动力装置迫使大鼠不停地运动，从而达到睡眠剥夺的目的。此类方法的优点是睡眠剥夺效果明显，睡眠剥夺的时间及强度易于掌握，重复性好，无须实验人员随时观察实验情况，减轻了实验人员工作强度。缺点是长时间运动引起机体的一系列应激反应可能干扰睡眠剥夺的实验结果，现选取其中两种有代表意义的方法介绍如下

2.1水平转盘睡眠剥夺法

此方法应用广泛，于 1983 年先应用在睡眠剥夺实验中，实验装置由一个电脑控制台、一个水平转盘及两个开放的长方形有机玻璃缸组成，转盘直径为 46 cm，在电脑控制下可以按顺时针逆时针方向随机水平转动! 两只有机玻璃缸的尺寸均为长60 cm ，宽20.5 cm，高 60 cm 。在距离缸底 5 cm 处的缸侧壁开有一条缝隙，使转盘的一半能分别从缝隙伸入两只玻璃缸中并能随意转动。缸底留置水约 2 cm 深，转盘离水面约3 cm 实验前1周将睡眠剥夺大鼠头颈部植入微电极' 并将微电极与电脑控制台相连，将大鼠放在转盘上适应环境1周，每天约1 h让大鼠习惯在转盘上活动，进水，进食等。实验时将实验组的大鼠及对照组的大鼠分别置于两只缸中的转盘上，当电脑通过微电极监测到实验组大鼠进入慢波或快波睡眠的脑电信号后，立即发出指令使转盘转动 6 s(6 s内转动 1/3 圈)，当大鼠被转到玻璃缸壁时，因被玻璃缸壁挡住而可能掉入水中，每次在实验组睡眠剥夺大鼠进入睡眠时转盘即转动 6 s，方向随机，转盘转动时两只大鼠均被动地随着转盘移动。此方法一次只剥夺一只大鼠睡眠，当实验组的睡眠剥夺大鼠在活动、进水、进食时转盘并不转动而此时对照组的大鼠则可趁机睡觉以弥补被剥夺的睡眠。此方法中睡眠剥夺组大鼠与对照组大鼠条件极其相似，因而可减少因实验条件不同而所致的应激反应。

的定义是持续两年或以上，每年里超过三个月的有痰咳嗽。大部分患者有慢性阻塞性。吸烟是常见的致病原因，其他原因包括空气污染和***（后者重要性较低）。的是戒烟、预防、复康、吸入性剂和类固醇。一些患者需要长期吸氧或移植。

一、实验材料

LPS（Sigma公司）

SD大鼠（6周龄）

二、实验方法

SD大鼠用10%水合氯醛，仰卧固定于操作台，使用***剪剪开颈部皮肤，暴露气管，将LPS（1mg/kg）注入气管，饲养三周。