辽宁***切片承诺守信「英瀚斯」

 病理实验外包，冰冻切片取样实验步骤：一、 取材应尽可能快地采取新鲜的材料，防止***发生死后变化。二、速冻1.  将***块平放于软塑瓶盖或小盒内（直径约2 cm）。2.  如***块小可适量加OCT包埋剂浸没***，然后将小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.  当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮中，大约10~20 s***即迅速冰结成块。4  在制成冻块后，即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。13周后，模型组大鼠体重比对照组明显下降，胃黏膜厚度明显减小。5.  若需要保存，应快速以铝箔或塑料薄膜封包，立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.  样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻***置于其上，4℃冰箱预冷5~10 min 让OCT胶浸透***。2.  取下***置于锡箔或者玻片上，样品托速冻。3.  ***置于样品托上，其上再添一层OCT胶，以完全覆盖为宜，速冻架（PE）上30 min。

 病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（的量视***大小而定，原则是可以均匀覆盖***面，且保证整个过程中不会使***干涸）。3.  将切片放在加了PBS的组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.  滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。【造模机制】以15％氯化钠配制的60％乙醇可以模拟高盐和乙醇对胃的刺激作用，并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的刺激作用。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7.  回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下。8.  做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。

 病理实验外包，病理染色常见染色介绍油红O染色：油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示***内的脂肪常采用油红O进行染色的方法，油红O为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性的使***内甘油三酯等中性脂肪着色。目前透射电镜已经广泛的应用到***zheng研究，病毒学研究，微生物学，细胞学研究等生物领域。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本　人或动物的肝***等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。

2. 改良的油红O染色液　油红O 0. 5g, 50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。

3. 染色步骤　①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。