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发布时间:2022-04-19 11:56:21
实验动物的分组
(一)分组的原则:进行动物实验时,经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。病理表现为纤维***和平滑肌为主,可有大量泡沫样细胞形成斑块,这与人类的情况差距较大。
每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验,就要求选较多的动物,以补足动物自然和认为处死所丧失的数量,确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
(二)建立对照组:分组时应建立对照组。1.自身对照组:是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果,此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组:有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的或手段,负对照组则不给任何处理。科学家利用电子芯片技术遥控瘫痪实验鼠行走据国外媒体报道,科学家创造了一种“遥控”实验小鼠。3.具体分组时,应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号,然后令其双数为A组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时,应该用随机数字表示进行完全随机分组。
实验动物各种体液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用***方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围***分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到的距离,把穿刺针的长度固定好。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 急性实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。如是大鼠,需***剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理盐水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,进行分析。实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。
2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分,缝合起来形成小胃,主胃与小胃互不相通,主胃进行正常消化,从小胃可收集到纯净的胃液。动物模型设计注意事项注意所选用动物的实用价值模型应适用于多数研究者使用,容易,实验中便于操作和采集各种标本。应用该法,可以待动物***健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。
(三)胰液和胆汁
在动物实验中,主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。至56dluan巢呈现多囊样改变,6个月后该病理改变呈渐进性发展趋势。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。
有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。
1.2 实验方法优势
这种实验方法相对于被动回避(穿梭实验、避暗实验)等实验的优点在于:这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性,不需要动物学习任何规则来趋利避害,能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。
2、电刺激Y迷宫测试原理
该测试方法更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。
2.1 电刺激Y迷宫使用方法
Y 迷宫由3 个相同的臂组成,分别称为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。通常把下臂( Ⅰ臂)定为起步区,左侧( Ⅱ臂) 为安全区,右侧( Ⅲ臂) 为区,三臂相交处为隔离区(0 区) 。迷宫底铺以铜棒,可以通电刺激。三臂顶端各装有15W 的信号灯。实验前先将大鼠放入迷宫,让其适应5 min ,训练组大鼠在起步区予以致其逃至安全区,灯光持续15 s ,然后熄灯休息45 s ,开始下一次操作。每次实验在每只大鼠上重复20 次为一轮。实验在黑暗、安静的环境中进行。结果jia亢方能降低jia亢大鼠xie清T3、T4、FT3、FT4含量,提高xue清TSH,以高剂量效果显著。凡大鼠受后10 s 内一次性从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续10 次中正确反应达9 次或以上定为学会标准。达到学会标准所需的次数表示学习记忆成绩,次数少说明学习能力强。
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