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实验动物的分组

(一)分组的原则：进行动物实验时，经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。应用该法，可以待动物***健康后，在动物清醒状态下反复采集胃液。动物分组应按随机分配的原则，使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去，以避免各组之间的差别,影响实验结果，特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。

每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验，就要求选较多的动物，以补足动物自然和认为处死所丧失的数量，确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。

(二)建立对照组：分组时应建立对照组。REMSD组大鼠在小台上屈曲而立，在快动眼睡眠(rapideyemovementsleep，REMS)时，由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头，大鼠落入水中而惊醒，再爬上站台。1.自身对照组：是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果，此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组：有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理，而给正对照组用同样方法进行处理，但并不采用实验所要求的或手段，负对照组则不给任何处理。3.具体分组时，应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号，然后令其双数为Ａ组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时，应该用随机数字表示进行完全随机分组。

实验动物大、小鼠的采血方法

1、动物实验中剪尾采血：需血量少时可用此方法。但本模型(犬)在测定肺功能时表明，动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例，同时病理***学也证实动物气道萎缩，气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约5mm，从尾根部向尾端部，血即从断端流出。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，止血。如将动物取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml，大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。

2、动物实验中摘眼球采血：此法常用于鼠类大量采血。利用这类动物***模型来研究人类***的优点，就是***的发生并发展与人类相应的***很相似，均是在自然条件下发生的***，其应用价值就很高，但是这类模型来源较困难，不可能大量应用。用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。

大鼠后眼框静脉丛取血方法

4、动物实验中颈静脉或颈动脉采血：将鼠，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离***，用即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

5、断头采血：操作者左手拇指和食指握住鼠颈部，头朝下，用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部，提起动物，血液即可流入准备好的容器中。

6、心脏采血：将动物，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺，血液借心脏跳动的力量进入。亦可在动物后，切开动物胸腔，直视心脏内抽血或剪破心脏，直接用、吸管等吸血。

Y迷宫实验几种常见的行为学测试方法

1、Y迷宫（Y-Maze）交替行为测试原理

Y-迷宫由Dellu F等发明，被广泛应用于功能减退、趋向性、空间工作记忆等研究领域。脑卒中模型大鼠方法:SD大鼠，雌雄不拘,体重为250?300g，经腹腔***水合氯醛（350?400mg/kg体重的剂或戊ba比妥钠(50?60mg/kg体重的剂量)ma醉后，仰卧位固定，剃除颈部毛发，***区域皮肤常规消毒。Y迷宫主要用于研究啮齿类动空间工作记忆，其完全是利用实验动物对新异环境探索的天性，由于动物每次转换探索方向时都需要记住前一次探索过的方向，因此Y型迷宫实验能够有效地测定动物的空间工作能力。

1.1  Y迷宫交替行为测试及参数

  自制Y迷宫，由3等长臂组成（50cm×18cm×35cm），每两个臂之间夹角为

120度，在***处各有一个可移动的隔板，迷宫内臂及底部均涂为黑色。能改善jia亢模型大鼠甲状腺***病理变化,其中高剂量组甲状腺***结构基本同正常组。参照文献实验操作方法并加以改进，将大鼠放在Y迷宫任意一臂末端，任其自由探索8min，摄像系统记录动物8min的行为变化，记录以下各项指标：①总进臂次数（the total number of entries）：动物进入迷宫臂的次数（以大鼠四只脚均进入臂为进臂一次标准）；②轮流（交替）一次（an alternation）：依次连续进入Y迷宫全部三个臂一次。③*大轮流次数（The number of maximum alternati）：总进臂次数-2。自***流行为得分=总轮流次数/*大轮流次数*100%。