四川动物实验课题外包来电垂询「英瀚斯」

在各种致病因素作用下，大脑实质受到损伤后可出现***功能改变，如偏瘫、平衡失调等。

对于***系统***动物模型而言，造模结束只是步，验证个体模型是否成功是第二步，而控制组内个体特征一致性是第三步。

采用***功能评分是重要的观察指标，可以用来在体评价模型是否成功或者病变严重程度。尽量控制动物模型的评分一致性是很困难但不得不做的一件事。

这里介绍三种常见的啮齿类***功能评分方法。

一、【Longa评分法】

① 无***功能缺陷：0分；

②瘫痪侧前爪不能完全伸展：1分；

③行走时向瘫痪侧转圈：2分；

④行走时向瘫痪侧倾倒：3分；

⑤不能自动行走，存在意识丧失现象：4分。

二、【Bederson评分法】

抓起动物的尾巴，使动物离台面10cm高。此时，正常大鼠的前爪处于伸直状态，而存在***功能病变的动物则可出现如下表现：

②动物尾巴提起后，瘫痪侧前肢回收并屈于腹下，而正常侧肢体伸向台面：1分；

③除第二条表现以外，俯卧于台面时向瘫痪侧侧推动物的阻力较正常侧明显降低：2分；

④除条和第二条以外，动物行走时向瘫痪侧旋转：3分。

三、【平衡木评分法】

一根长为80cm、宽为2.5cm的木条，水平固定在离台面10cm高度的地方，然后让动物在木条上行走。

①能跳上平衡木条，可以自由行走但不跌倒：0分；

②能跳上平衡木条，动物在上面行走会跌下，但跌下的机会小于50%：1分；

③能跳上平衡木条，动物在上面行走会跌下，但跌下的机会大于50%：2分；

④动物在正常侧身体的帮助下可以跳上平衡木条；但是瘫痪侧的后肢不能够帮助身体向前移动：3分；

⑤动物无法在平衡木条上行走，但是可以坐在木条上：4分；

⑥将动物放在木条上，动物很快会掉落下来：5分。

灌注固定主要用于***系统，其他***意义不是很大，而且耗时耗力。对***系统防止变性效果较好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠时一般采用输液器的针头 (4 号半，这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白，针头要从心轴方向进针，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，开始灌流后剪破右心耳，约 40 毫升生理盐水，后再灌流约 20 毫升多聚甲醛，整个灌流固定的过程就完成了。

注意事项

1. 针头大小与动物的种类有关，t 同时针头一定要磨钝。

2. 检查灌注泵的运作情况，一定排出管子的气泡和空气，防止空气栓塞。

3. 经腹腔暴腔，先清楚升主动脉外面的脂肪***和心外膜***。

4. 将针头经左心室插入升主动脉（颜色变白的哦），并用钳子固定。

5. 解开右心耳，同时开启灌注泵。注意，不要随便揭开心脏的其他部位，否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功，尤其。

6. 将 4 度的生理盐水（好已动物的发白为标准，我们实验室的大鼠约用 250ml）和多聚甲醛 (根据所取得材料而定) 依次灌入。

7. 整个过程均应将动物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。