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实验动物的分组

(一)分组的原则：进行动物实验时，经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。瑞士洛桑联邦理工学院的SilvestroMicera博士补充说：英国“废除解剖学”的JarrodBailey博士对此研究表示谴责。动物分组应按随机分配的原则，使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去，以避免各组之间的差别,影响实验结果，特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。

每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验，就要求选较多的动物，以补足动物自然和认为处死所丧失的数量，确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。

(二)建立对照组：分组时应建立对照组。因其对一定种类的动物的胰岛β细胞有选择性***作用，能诱发许多动物的tang尿病，所以一般用它来构建糖tang尿病模型。1.自身对照组：是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果，此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组：有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理，而给正对照组用同样方法进行处理，但并不采用实验所要求的或手段，负对照组则不给任何处理。3.具体分组时，应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号，然后令其双数为Ａ组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时，应该用随机数字表示进行完全随机分组。

实验动物各种体液、的采集方法

消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性实验中， 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。

2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液，要用***方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围***分开，穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。能改善jia亢模型大鼠甲状腺***病理变化,其中高剂量组甲状腺***结构基本同正常组。这种方法可以收集到较纯净的唾液。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性实验时，先将动物，将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一，用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。实验方法Step1：用高脂肪高糖的膳食饲喂小鼠，诱导出胰岛素，持续约4-6周。如是大鼠,需***剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理盐水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，进行分析。

2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。在管理上要尽可能避免设施的不足或缺陷和可能出现的漏洞，使设施可能的规范管理或充分发挥设施潜在的可进行的规范管理。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常消化，从小胃可收集到纯净的胃液。应用该法，可以待动物***健康后，在动物清醒状态下反复采集胃液。

(三)胰液和胆汁

在动物实验中，主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。这类模型在遗传病、代谢病、缺陷病、***和等方面的应用正日益增多。狗的胰总管开口于十二指肠降部，在紧靠肠壁处切开胰管，结扎固定并与导管相连，即可见无色的胰液流入导管。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，可分别收集到胰液和胆汁。

有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。

实验动物的标记

1. 染色法　适用于小动物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学***涂在动物的被毛上，以不同颜色来区分动物。常用的化学***有：3%～5%溶液（***）、0.5%中性品红（红色）、2%（咖啡色）。

标记的原则是：先左后右，从上到下。如果动物编号是二位数或三位数，那相应的用二种或三种不同的颜色，不同颜色代表不同位数（个位、十位、百位），标记的原则同上。

2. 挂牌法　常用于大动物。写有编号的金属牌挂在动物的颈上来区分动物。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记，只记录它们的外表特征和毛色即可。

3. 笼子编号　标记在笼子上。

以上只介绍了几种的方法，在使用中可灵活掌握。

丙泊酚干预对大鼠视***损伤的影响

　方法： SD大鼠67只，随机取20只为正常组，不予任何处理。将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约5mm，从尾根部向尾端部，血即从断端流出。余行视***钳夹法造模，造模成功42只纳入实验。随机分为：模型对照组和丙泊酚组，各21只/组。造模后4 d，以TUNEL法检测大鼠视网mo和视***细胞凋亡，造模后7 d，RT-PCR、Western-blot检测视wang膜和视***节细胞***Caspase-3、BCL-2***和蛋白表达。造模后14 d，行闪光视觉诱发电位检测，处死大鼠取眼球，观察各组大鼠视wang膜和视***的病理形态，行视wang膜***节细胞计数。