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发布时间:2022-09-05 13:19:41
细胞实验介绍——细胞运动能力检测:
细胞划痕实验是体外模拟细胞迁移能力和修复能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中,沿着中线使用移液器头或者其他硬物划1-3条平行的直线,去除中线的细胞,细胞在0h、12h、24h后,观察细胞往中线迁移情况,判断细胞迁移能力。
一般流程:细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照
细胞迁移和侵袭实验是体外模拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚碳酸酯膜transwell小室放入培养板中,将细胞接种于小室中,利用培养液成分的差异诱导细胞运动,检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。
一般流程:transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照
结果示例:
图 A 细胞划痕实验图;B,C 细胞迁移和侵袭实验图
细胞生物学服务
南京英瀚斯生物科技公司自建有标准的细胞培养房,配备有生物安全柜、超净工作台、细胞三气培养箱、二氧化碳细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、、流式细胞仪等设备。细胞组技术人员毕业于东南大学、华中科技大学等高校生物学相关,具有硕士研究生以上学历,熟练掌握细胞学相关实验,可开展多种细胞实验。动物实验外包选英瀚斯生物科技有限公司。消化传代后细胞呈短梭形或三角形,单层生长,铺路石状,Ⅷ因子表达阳性,呈指数增殖。
Q:中的沉淀物对细胞培养有什么影响?
A:(1)细胞生长,我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,我们的客户以及其它生产商也证明了这一点。
(2)过滤,如果中出现大量的沉淀物,将很难过滤。一般说来,因为在生产工序中已经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此不推荐再过滤用于细胞培养 的。在实验室中没有必要再过滤处理,在大规模的细胞培养中往往将直接加到培养基中一起 过滤。(5)把消化所得的软gu细胞混悬液收集于离心管中,经滤网过滤后用细胞计数板计数,并把细胞混悬液密度调整为2x105/ml接种于25cm2规格的培养瓶中。
(3)污染,磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起。研究者可能会在中观察到一些絮状的 沉淀,因此就会比较警觉的去做无菌试验,将放在培养箱中培养几天,结果可能会观察到更多的絮状 沉淀,因此就断定被污染了。并且当研究者将样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可 以运动的小黑点,因此就更加确认是被污染了。于是,研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商 确认,但终确定没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生,我们建议不要直接将放在 培养箱中培养观察是否有菌,而是将加到琼脂板上进行培养以观察是否有***生长。另外,也可以进 行革兰氏染色,在油镜下观察,以确认是否有污染。这种掺入可以稳定存在,随着DNA进入子细胞中BrdU特异性可以用于检测BrdU的掺入,从而判断细胞的增殖能力。
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